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2014年Nature Methods年度技術(shù)

   2025-04-05 lifeomics415
2014年年度技術(shù)方法的評(píng)選結(jié)果已塵埃落定,激光層照熒光顯微技術(shù)擊敗其它挑戰(zhàn)者,拔得頭籌。那么什么新技術(shù)有可能會(huì)成為明年的年度技術(shù)之星呢?Nature Methods選擇性地提出了一些在未來(lái)幾年里值得關(guān)注的方法和方法學(xué)發(fā)展領(lǐng)域。

2014年Nature Mehtods年度技術(shù)

  激光層照熒光顯微技術(shù)(light-sheet fluorescence microscopy)能夠?qū)铙w樣本進(jìn)行三維成像,該技術(shù)所產(chǎn)生的光毒性較低,且成像速度快。

  激光層照熒光顯微技術(shù)能夠以很高的三維分辨率對(duì)生物樣本進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的、較為溫和的成像。特別是當(dāng)該技術(shù)與高速照相機(jī)相結(jié)合時(shí),就能夠快速地捕捉細(xì)胞或亞細(xì)胞水平上的動(dòng)態(tài)變化。由于激光層照熒光顯微技術(shù)能夠快速地對(duì)生物樣本進(jìn)行較為溫和的容積成像,因此Nature Mehtods將該技術(shù)評(píng)選為2014年年度技術(shù)(Method of the Year 2014)。

  這一技術(shù)的基本原理非常簡(jiǎn)單。寬場(chǎng)顯微技術(shù)(wide-field microscopy)或共聚焦顯微技術(shù)(confocal microscopy)需要照射或掃描成像目標(biāo)物中的整個(gè)樣本,而激光層照熒光顯微技術(shù)則與這兩種技術(shù)不同,它只需要用薄層光(實(shí)際上為2D)從側(cè)邊照射樣本。隨后從樣本的上部或下部檢測(cè)所產(chǎn)生的熒光信號(hào),檢測(cè)方向與薄層光線的照射方向相垂直。因此,該技術(shù)的光學(xué)層析能力(optical sectioning,即z層面上樣本結(jié)構(gòu)的分辨能力)不像共聚焦成像技術(shù)那樣取決于焦點(diǎn)處光子的采集,而是來(lái)自于在最開(kāi)始時(shí)每次僅激發(fā)一個(gè)層面上的熒光基團(tuán)。換而言之,激光層照顯微技術(shù)只會(huì)激發(fā)一個(gè)焦平面上或旁邊的分子,因此大大降低了光毒性,并且提高了長(zhǎng)時(shí)間對(duì)活體樣本進(jìn)行成像的能力。

  值得注意的是,如果希望激光層照成像技術(shù)達(dá)到最佳的效果,那么就需要使用較小塊的透明樣本。對(duì)于不太透明的大塊樣本而言,我們?nèi)匀槐仨毾朕k法解決散射和像差的問(wèn)題。最后,激光層照成像技術(shù)的用戶仍然需要監(jiān)測(cè)潛在的光毒性,雖然該技術(shù)能夠降低光毒性,但是并不代表它能夠完全消除光毒性。我們預(yù)測(cè),在接下來(lái)令人激動(dòng)的幾年里,激光層照成像技術(shù)將會(huì)在更多的生物研究實(shí)驗(yàn)室中大放異彩。

  DIA質(zhì)譜分析法

  數(shù)據(jù)非依賴性采集(data-independent acquisition, DIA)質(zhì)譜分析法可能會(huì)改變蛋白質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)的生成方式。

  認(rèn)識(shí)非編碼RNA

  未來(lái)將出現(xiàn)一些能夠描述非編碼RNA功能的研究方法。

  體內(nèi)電壓感受器

  基因編碼的電壓指示器將會(huì)讓研究者能夠在體內(nèi)對(duì)神經(jīng)元的活動(dòng)進(jìn)行顯像。

  下一代CRISPR

  隨著CRISPR-Cas系統(tǒng)的不斷成熟,研究者們開(kāi)始考慮CRISPR-Cas系統(tǒng)的特異性、功效、甚至真核生物核酸酶的應(yīng)用可能性。

  微小結(jié)晶的結(jié)構(gòu)

  我們能夠利用X射線和電子衍射法,從微晶體中確定蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。

  超分辨率CLEM

  超分辨率關(guān)聯(lián)光學(xué)和電子顯微鏡技術(shù)(correlated light and electron microscopy, CLEM)的功能非常強(qiáng)大。

  蛋白質(zhì)的納米孔道

  納米孔道將為單個(gè)蛋白質(zhì)的特征性描述帶來(lái)希望。

  深層成像技術(shù)

  我們可以更近距離地查看大腦等器官的深層結(jié)構(gòu)。

 
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