一、流動(dòng)相的pH應(yīng)在使用范圍內(nèi)
以硅膠為基質(zhì)的反相色譜柱的pH范圍為2~9，流動(dòng)相超過(guò)其pH范圍將會(huì)導(dǎo)致硅膠基質(zhì)流失和鍵合相碳鏈斷裂，使柱效下降，壽命變短。
以硅膠為基質(zhì)的反相色譜柱的pH范圍為2~9，流動(dòng)相超過(guò)其pH范圍將會(huì)導(dǎo)致硅膠基質(zhì)流失和鍵合相碳鏈斷裂，使柱效下降，壽命變短。
二、去除樣品和流動(dòng)相匯總的固體顆粒
樣品和流動(dòng)相中含有固體顆粒物質(zhì)會(huì)堵塞色譜柱篩板，不僅會(huì)引起柱壓的升高，而且也會(huì)引起柱效下降。因此，建議使用超純水和色譜純?cè)噭诜治銮皩?duì)樣品進(jìn)行針筒過(guò)濾，流動(dòng)相過(guò)0.45um濾膜。
樣品和流動(dòng)相中含有固體顆粒物質(zhì)會(huì)堵塞色譜柱篩板，不僅會(huì)引起柱壓的升高，而且也會(huì)引起柱效下降。因此，建議使用超純水和色譜純?cè)噭诜治銮皩?duì)樣品進(jìn)行針筒過(guò)濾，流動(dòng)相過(guò)0.45um濾膜。
三、使用保護(hù)柱或在線過(guò)濾器
保護(hù)柱和在線過(guò)濾器上都有篩板，其孔徑與色譜柱篩板孔徑相同，因此可以阻止固體顆粒物質(zhì)到達(dá)色譜柱，有效防止色譜柱篩板的堵塞。由于柱壓升高在分析故障中占很大比例，因此除對(duì)樣品和流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)濾外，建議您在色譜柱進(jìn)樣端加上保護(hù)柱或在線過(guò)濾器。
保護(hù)柱和在線過(guò)濾器上都有篩板，其孔徑與色譜柱篩板孔徑相同，因此可以阻止固體顆粒物質(zhì)到達(dá)色譜柱，有效防止色譜柱篩板的堵塞。由于柱壓升高在分析故障中占很大比例，因此除對(duì)樣品和流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)濾外，建議您在色譜柱進(jìn)樣端加上保護(hù)柱或在線過(guò)濾器。
四、正確使用緩沖鹽
緩沖鹽使用不當(dāng)會(huì)使其在流動(dòng)相（含有機(jī)溶劑）中析出，堵塞填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的空隙，使填料板結(jié)，柱壓上升；同時(shí)阻礙了基質(zhì)上的鍵合的碳鏈自由舒展，使用色譜柱的保留能力下降，柱效降低。
緩沖鹽使用不當(dāng)會(huì)使其在流動(dòng)相（含有機(jī)溶劑）中析出，堵塞填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的空隙，使填料板結(jié)，柱壓上升；同時(shí)阻礙了基質(zhì)上的鍵合的碳鏈自由舒展，使用色譜柱的保留能力下降，柱效降低。
建議使用前要過(guò)濾，使用后要沖洗。具體方法如下：
1、等度條件：使用緩沖鹽前和使用后需要過(guò)濾流動(dòng)相1.0ml/min流速?zèng)_洗60min.
2、梯度條件：用含有緩沖鹽的流動(dòng)相跑梯度之前，用與初始流動(dòng)相組成相同的過(guò)濾流動(dòng)相似1.0ml/min流速?zèng)_洗60min；分析完成后，再用該過(guò)濾流動(dòng)以1.0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動(dòng)相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩，以避免梯度過(guò)程中緩沖鹽析出。
1、等度條件：使用緩沖鹽前和使用后需要過(guò)濾流動(dòng)相1.0ml/min流速?zèng)_洗60min.
2、梯度條件：用含有緩沖鹽的流動(dòng)相跑梯度之前，用與初始流動(dòng)相組成相同的過(guò)濾流動(dòng)相似1.0ml/min流速?zèng)_洗60min；分析完成后，再用該過(guò)濾流動(dòng)以1.0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動(dòng)相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩，以避免梯度過(guò)程中緩沖鹽析出。
五、柱清洗方法：
1、未使用緩沖鹽：每天分析完成后，用純甲醇或純乙腈反向沖洗色譜柱60min。
2、使用過(guò)緩沖鹽：分析完成后，先后用上述方法除去緩沖鹽，然后再用純甲醇或乙腈反向沖洗色譜柱60min。
1、未使用緩沖鹽：每天分析完成后，用純甲醇或純乙腈反向沖洗色譜柱60min。
2、使用過(guò)緩沖鹽：分析完成后，先后用上述方法除去緩沖鹽，然后再用純甲醇或乙腈反向沖洗色譜柱60min。
