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公司基本資料信息
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CELL-WISE 293無(wú)血清培養(yǎng)基信息:
品牌 |
產(chǎn)品名稱 |
貨號(hào) |
規(guī)格 |
報(bào)價(jià)(RMB) |
CELL-WISE |
BalanceCD293 培養(yǎng)基 |
CW01001 |
1L |
400 |
293無(wú)血清培養(yǎng)基產(chǎn)品描述:
Balance CD 293 培養(yǎng)基適用于懸浮培養(yǎng)條件下的HEK293細(xì)胞(如293-F,293-T, Expi-293F
等)的高密度生長(zhǎng)和瞬時(shí)轉(zhuǎn)染表達(dá)。 Balance CD 293 培養(yǎng)基含有細(xì)胞生長(zhǎng)所需的全部營(yíng)養(yǎng)成份,無(wú)需添加任何添加物即可使用。(注意:此培養(yǎng)基不包含抗生素以及血清)
293無(wú)血清培養(yǎng)基產(chǎn)品特點(diǎn):
瞬時(shí)轉(zhuǎn)染專用培養(yǎng)基,適用于HEK293細(xì)胞高密度懸浮培養(yǎng)
無(wú)蛋白、無(wú)動(dòng)物源、化學(xué)成分限定
即用型完全培養(yǎng)基,無(wú)需添加額外成分
CELL-WISE的293無(wú)血清培養(yǎng)基技術(shù)參數(shù):
外觀: |
澄清透明紅色液體 |
滲透壓: |
275±15 mOSM |
pH: |
6.9-7.4 |
無(wú)菌檢測(cè): |
無(wú)菌 |
內(nèi)毒素: |
<5 EU/mL |
儲(chǔ)存條件: |
2-8℃,避光 |
效期: |
12個(gè)月 |
產(chǎn)品用途: |
僅用于科學(xué)研究,不適用于人類或動(dòng)物的診斷和治療 |
CELL-WISE的293無(wú)血清培養(yǎng)基使用方法:
細(xì)胞馴化
1)直接馴化
大部分情況下,培養(yǎng)于其他培養(yǎng)基中的細(xì)胞,可以直接適應(yīng)Balance CD 293 medium,只要按照日常傳代方式(稀釋)更換培養(yǎng)基即可。
2)漸進(jìn)式馴化
注意:選用低代次、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行馴化
①在原培養(yǎng)基中復(fù)蘇細(xì)胞并繼續(xù)使用該培養(yǎng)基傳代2到3次至細(xì)胞生長(zhǎng)穩(wěn)定,當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到2x10 6 cells/ml后進(jìn)行傳代,傳代細(xì)胞密度控制在0.5-0.6×10 6 cells/mL,5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無(wú)血清培養(yǎng)基與Balance CD 293培養(yǎng)基的比例為75:25;
②將細(xì)胞置于37℃,5% CO2,轉(zhuǎn)速為110-175 rpm的恒溫?fù)u床中進(jìn)行培養(yǎng);
③當(dāng)細(xì)胞密度3-4天后達(dá)到3x10 6 cells/ml且細(xì)胞活率>90%,傳代時(shí)5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無(wú)血清培養(yǎng)基與Balance CD 293培養(yǎng)基的比例為50:50,細(xì)胞密度控制在0.5×10 6 cells/mL。如細(xì)胞生長(zhǎng)慢,可離心上清,留20%條件培養(yǎng)基,加入80%的5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無(wú)血清培養(yǎng)基與Balance CD 293 培養(yǎng)基比例為75:25的混合培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng);
④重復(fù)步驟③逐步增加Balance CD 293培養(yǎng)基所占的比例(5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無(wú)血清培養(yǎng)基與Balance CD 293 培養(yǎng)基的比例為25:75至10:90)直到100%的Balance CD 293培養(yǎng)基;
⑤經(jīng)過(guò)在100%的 Balance CD 293 培養(yǎng)基中的幾次傳代培養(yǎng),傳代后3-4天細(xì)胞的密度可以達(dá)到2-3×10 6 cells/mL,細(xì)胞活率大于90%,這說(shuō)明細(xì)胞已經(jīng)完全適應(yīng)了Balance CD 293 培養(yǎng)基。之后進(jìn)行細(xì)胞的傳代培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞的起始密度可以降到0.3×10 6 cells/mL,一般傳代2-3次后再進(jìn)行轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。
注意: 一般細(xì)胞馴化過(guò)程中,前三代細(xì)胞的狀態(tài)可能不是很好,但一般從第四代狀態(tài)會(huì)有改善。
細(xì)胞傳代
1)取細(xì)胞培養(yǎng)樣品,人工或儀器測(cè)定細(xì)胞密度以及活率;
2)計(jì)算傳代所需的細(xì)胞用量,建議起始細(xì)胞密度為0.2-0.4×10 6 cells/mL。建議復(fù)蘇的細(xì)胞至少培養(yǎng)兩代后再用于其他用途。傳代培養(yǎng)體積建議為15-20 mL(100 mL的培養(yǎng)瓶)或50-60 mL(250 mL 的培養(yǎng)瓶);
3)將細(xì)胞置于37℃,5%CO2,轉(zhuǎn)速為110-175 rpm的恒溫?fù)u床中進(jìn)行培養(yǎng),3-4天傳代一次。
細(xì)胞轉(zhuǎn)染在Balance CD 293培養(yǎng)基中,采用商業(yè)化轉(zhuǎn)染試劑(例如 Gibco 293Fectin™ExpiFectamine™ 293 Transfection Kit )或 PEI 可以實(shí)現(xiàn)對(duì) HEK293 細(xì)胞的高效轉(zhuǎn)染。
徠創(chuàng)生物簡(jiǎn)介:徠創(chuàng)生物是一家專注于生物技術(shù)領(lǐng)域的高新技術(shù)企業(yè),由數(shù)位生物領(lǐng)域資深專家創(chuàng)辦。公司現(xiàn)有員工60余人,其中博士以上學(xué)歷占比24.2%,碩士及以上學(xué)歷占比53.1%。主營(yíng)業(yè)務(wù)包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、化學(xué)試劑及實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備和相關(guān)耗材,并提供從基因設(shè)計(jì)、構(gòu)建到檢測(cè)的一站式技術(shù)服務(wù)。