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細(xì)胞培養(yǎng)室的設(shè)備

   2018-05-22 現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室裝備網(wǎng)993
核心提示:細(xì)胞培養(yǎng)室,最好選擇獨(dú)立房間,超凈臺應(yīng)放置在比較潔凈的房間,如果條件允許,最好按潔凈廠房要求設(shè)計(jì)細(xì)胞培養(yǎng)室,即使房間做不到空氣過濾,也至少應(yīng)是專用的,進(jìn)出時要更換工作衣。
 細(xì)胞培養(yǎng)室的設(shè)備

 

①超凈工作臺:

 

超凈工作臺的種類很多,有單面單人、單面雙人、雙面雙人或雙面四人等,其工作原理是利用鼓風(fēng)機(jī),使通過高效濾氣的空氣,徐徐通過臺面,這樣使工作環(huán)境中具無菌而均勻的空氣。

 

根據(jù)層流方式的不同,超凈工作臺主要分為水平層流式和垂直層流式兩種,基本原理大致相同,都是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過濾器初濾,由離心風(fēng)機(jī)壓入靜壓箱,再經(jīng)高效空氣過濾器,由此送出的潔凈氣流從一定的均勻的斷面風(fēng)速通過無菌,從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環(huán)境。但兩種凈化臺的氣流方向不同。

 

使用超凈工作臺應(yīng)注意的幾點(diǎn)問題:

 

A.凈化工作臺最好安裝在無塵的房間內(nèi),最好為隔離好的無菌間內(nèi),以免塵土過多易使濾器阻塞,降低凈化效果,縮短使用壽命。

 

B.新安裝的或長期未使用的工用臺,工作前必須對工作臺和周圍環(huán)境用真空吸塵器或不產(chǎn)生纖維的工具進(jìn)行清潔工作,再采用藥物滅菌法或紫外線滅菌法進(jìn)行滅菌處理。

 

C.每次使用工作臺時,應(yīng)先用75%酒精擦洗臺面,并提前以30~50min紫外線滅菌燈處理凈化工作區(qū)內(nèi)積累的微生物。在關(guān)閉紫外燈后應(yīng)啟動送風(fēng)機(jī)使之運(yùn)轉(zhuǎn)兩分鐘后再進(jìn)行培養(yǎng)操作。

 

D.凈化工作區(qū)內(nèi)不應(yīng)存放不必要的物品,以保持潔凈氣流型不受干擾。

 

E.一般情況下,高效過濾器三年更換一次。更換高效濾器應(yīng)請專業(yè)人員操作,以保持密封良好。要定期將粗過濾器中的過布(無紡布)拆下清洗,時間應(yīng)根據(jù)環(huán)境潔凈程度而定,通常間隔3~6個月進(jìn)行一次。


F.每次使用凈化臺要及時清除工作臺面上的物品,并用灑精擦洗臺面使之始終保持潔凈。

 

②4℃冰箱和低溫冰箱;

 

③CO2培養(yǎng)箱:

 

A.一定濃度的CO2對細(xì)胞生長,尤其是原代培養(yǎng)和單細(xì)胞培養(yǎng)有促進(jìn)作用(5%)。

 

B.一定濃度的CO2可維持培養(yǎng)液恒定的pH。適用于開放培養(yǎng),培養(yǎng)箱封口后,可在一般恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),但是采用培養(yǎng)皿或多孔板培養(yǎng)時,則需要高濕度和高CO2含量的空氣。

 

C.它增加了濕度,箱體內(nèi)裝有水浴,可以保證培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度。

 

D.培養(yǎng)箱內(nèi)裝有紫外燈。

 

E.通過氣體流量計(jì)可以調(diào)節(jié)CO2和空氣的比例。

 

F.在水中可加入防腐劑(二氧乙酸)。可防止因CO2培養(yǎng)箱中濕度較高,易長霉菌。

 

④臭氧發(fā)生器;

 

④離心機(jī);

 

⑤CO2鋼瓶;

 

⑥液氮罐;

 

⑦儲品柜:用來存放雜物;

 

⑧紫外燈;

 

⑨空氣凈化系統(tǒng);

 

⑩倒置顯微鏡;

 

3.無菌操作

 

(1)無菌室的滅菌:

 

①紫外燈無人時就要打開;

 

②進(jìn)無菌室要穿無菌服、戴帽子和口罩;

 

③每周清洗消毒一次;

 

④所用物品要以外科手術(shù)方式嚴(yán)格消毒;

 

⑤室內(nèi)臺面要要保持潔凈,做完實(shí)驗(yàn)后,用75%酒精或千分之三新潔爾滅棉球擦拭超凈工作臺的臺內(nèi)、邊臺的臺面、倒置顯微鏡的載物臺等;

 

⑥所用物品要一次性準(zhǔn)備好;

 

⑦瓶口要用酒精火焰消毒;

 

⑧盡量減少出入。

 

(2)實(shí)驗(yàn)人員的無菌準(zhǔn)備:

 

①肥皂洗手

 

②穿好隔離衣

 

③酒精棉球擦手

 

細(xì)胞培養(yǎng)室必備的設(shè)備有:


1. 超凈臺;

 

2. 二氧化碳培養(yǎng)箱;

 

3. 倒置顯微鏡;

 

4. 二氧化碳壓縮氣體;

 

5. 液氮罐;

 

6.低溫冰箱(-20度和-70度);

 

7. 過濾裝置;

 

8. 離心機(jī);

 

9. 酶標(biāo)儀等等。


試劑和小的工器具也很多,如:培養(yǎng)基、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板、移液槍、酸缸、滴管、離心管、血球計(jì)數(shù)板、DMO、PBS、胰酶等等。


細(xì)胞培養(yǎng)室,最好選擇獨(dú)立房間,超凈臺應(yīng)放置在比較潔凈的房間,如果條件允許,最好按潔凈廠房要求設(shè)計(jì)細(xì)胞培養(yǎng)室,即使房間做不到空氣過濾,也至少應(yīng)是專用的,進(jìn)出時要更換工作衣。

 
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