近日,中國科學院深圳先進技術(shù)研究院研究員鄭煒與美國國立衛(wèi)生研究院教授Hari Shroff合作,成功研發(fā)出新型雙光子激發(fā)的超分辨光學顯微成像系統(tǒng)。
該系統(tǒng)同時具備超分辨光學顯微成像功能和大深度三維成像能力,使光學超分辨成像深度推進至破紀錄的250微米,相應(yīng)研究成果Adaptive optics improves multiphoton super-resolution imaging(《自適應(yīng)光學提升超分辨顯微成像》)最近發(fā)表在《自然-方法》(Nature Methods)上。
“看得細”和“看得深”是光學顯微成像領(lǐng)域面臨的兩大挑戰(zhàn),經(jīng)過科研人員幾十年來的不懈努力,無論是在“看得細”還是“看得深”方面,都涌現(xiàn)了一批創(chuàng)新技術(shù),取得了巨大成功,但是同時具備“看得細”和“看得深”這兩項功能的光學顯微成像技術(shù)卻并不多見。
在該項研究中,鄭煒等人把具備深層生物組織成像能力的雙光子顯微成像技術(shù)(Two-Photon Microscopy, TPM)和具備超分辨成像功能的瞬時結(jié)構(gòu)光照明顯微成像技術(shù)(InstantStructuredIllumination Microscopy, ISIM) 有機結(jié)合起來,實現(xiàn)雙光子激發(fā)的超分辨顯微成像功能。同時,研究人員又利用自適應(yīng)光學(Adaptive Optics, AO)技術(shù)成功克服了由生物組織引起的波前相位畸變問題,最終實現(xiàn)176納米的橫向分辨率、729納米的縱向分辨率及250微米的探測深度的成像效果。利用該技術(shù),可以對細胞、線蟲胚胎及幼蟲、果蠅腦片和斑馬魚胚胎開展高清晰三維成像研究,成像效果顯著優(yōu)于傳統(tǒng)雙光子成像質(zhì)量。值得一提的是,由于該技術(shù)提高了光子利用效率,從而降低了所需激光功率,可以對線蟲胚胎的發(fā)育過程開展長時間、高清晰的三維動態(tài)觀測。在長達1個小時的連續(xù)三維成像過程中未對線蟲胚胎發(fā)育造成任何影響,該技術(shù)對胚胎發(fā)育研究具有重要作用。
該研究得到了國家自然科學基金、國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展(“973”)計劃和深圳市海外高層次人才創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)孔雀計劃的項目支持。
編輯點評:顯微成像技術(shù)有兩大難題分別是“看得細”和“看得深”,中科院深圳先進院同時解決了這兩大難題,研發(fā)出新型雙光子激發(fā)的超分辨光學顯微成像系統(tǒng),為我國顯微技術(shù)發(fā)展做出了突出貢獻。