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福建檢疫局轉(zhuǎn)基因大豆檢測法獲國家發(fā)明專利

   2025-03-17 中國食品報416
      福建檢驗檢疫局日前發(fā)布消息稱,該局自主研發(fā)“轉(zhuǎn)基因大豆2704-12(品系)的LAMP檢測引物及方法”獲國家發(fā)明專利授權(quán)。這是福建檢驗檢疫局自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因檢測領(lǐng)域首個專利。目前,這項技術(shù)已作為檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(SN/T 3767.15-2014),在國內(nèi)轉(zhuǎn)基因大豆檢測中進(jìn)行推廣應(yīng)用。

  據(jù)福建檢驗檢疫局相關(guān)專家介紹,轉(zhuǎn)基因大豆2704-12品系是國家農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)允許進(jìn)口的,進(jìn)口時必須開展符合性驗證檢測的一種品系。國內(nèi)外還未見轉(zhuǎn)基因大豆A2704-12品系LAMP檢測引物及方法的報道。此次福建檢驗檢疫局自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因大豆檢測方法,首次設(shè)計、篩選到了轉(zhuǎn)基因大豆A2704-12品系的LAMP檢測引物,并建立普遍適用于基層實(shí)驗室的轉(zhuǎn)基因大豆A2704-12品系LAMP檢測方法。

  該方法具有高效、簡便、高特異性等優(yōu)勢。一是高效。LAMP方法只需要恒溫就能完成擴(kuò)增反應(yīng),沒有PCR反應(yīng)中那樣循環(huán)溫模板的變性、退火、復(fù)性過程,因此可將PCR法的2-3小時的擴(kuò)增時間縮短至約1小時,即能擴(kuò)增出109~1010倍靶序列拷貝,DNA產(chǎn)量高達(dá)500ug/mL,且能檢測到的拷貝數(shù)低至PCR檢測限的1/10。二是簡便。因LAMP的恒溫擴(kuò)增和產(chǎn)物直觀檢測的特點(diǎn)使其只需要一個簡單的恒溫器,無需昂貴的檢測設(shè)備,有利于對現(xiàn)場檢測或基層實(shí)驗室推廣應(yīng)用。三是高特異性。采用六個區(qū)段、六條引物對靶DNA序列進(jìn)行擴(kuò)增,決定了LAMP法的特異性高于只用1對引物進(jìn)行擴(kuò)增的PCR法。

  據(jù)悉,目前檢測轉(zhuǎn)基因特異品系的方法主要有普通PCR方法和實(shí)時熒光定量PCR方法。普通PCR方法耗時長,操作繁瑣,靈敏度不夠,容易產(chǎn)交叉污染,質(zhì)控復(fù)雜,假陽性、假陰性比例偏高。實(shí)時熒光定量PCR方法靈敏度高,但成本昂貴,技術(shù)要求高,且必須使用大型儀器設(shè)備。

  此次福建運(yùn)用LAMP這種新穎的恒溫核酸擴(kuò)增方法,在轉(zhuǎn)基因特異品系檢測領(lǐng)域有效建立了普遍適用于檢驗檢疫一線基層實(shí)驗室的快速、簡便、高效的轉(zhuǎn)基因品系檢測方法,檢測成本遠(yuǎn)低于熒光定量PCR。

 
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