據(jù)福建檢驗檢疫局相關(guān)專家介紹，轉(zhuǎn)基因大豆2704-12品系是國家農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)允許進(jìn)口的，進(jìn)口時必須開展符合性驗證檢測的一種品系。國內(nèi)外還未見轉(zhuǎn)基因大豆A2704-12品系LAMP檢測引物及方法的報道。此次福建檢驗檢疫局自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因大豆檢測方法，首次設(shè)計、篩選到了轉(zhuǎn)基因大豆A2704-12品系的LAMP檢測引物，并建立普遍適用于基層實(shí)驗室的轉(zhuǎn)基因大豆A2704-12品系LAMP檢測方法。
該方法具有高效、簡便、高特異性等優(yōu)勢。一是高效。LAMP方法只需要恒溫就能完成擴(kuò)增反應(yīng)，沒有PCR反應(yīng)中那樣循環(huán)溫模板的變性、退火、復(fù)性過程，因此可將PCR法的2-3小時的擴(kuò)增時間縮短至約1小時，即能擴(kuò)增出109～1010倍靶序列拷貝，DNA產(chǎn)量高達(dá)500ug/mL，且能檢測到的拷貝數(shù)低至PCR檢測限的1/10。二是簡便。因LAMP的恒溫擴(kuò)增和產(chǎn)物直觀檢測的特點(diǎn)使其只需要一個簡單的恒溫器，無需昂貴的檢測設(shè)備，有利于對現(xiàn)場檢測或基層實(shí)驗室推廣應(yīng)用。三是高特異性。采用六個區(qū)段、六條引物對靶DNA序列進(jìn)行擴(kuò)增，決定了LAMP法的特異性高于只用1對引物進(jìn)行擴(kuò)增的PCR法。
據(jù)悉，目前檢測轉(zhuǎn)基因特異品系的方法主要有普通PCR方法和實(shí)時熒光定量PCR方法。普通PCR方法耗時長，操作繁瑣，靈敏度不夠，容易產(chǎn)交叉污染，質(zhì)控復(fù)雜，假陽性、假陰性比例偏高。實(shí)時熒光定量PCR方法靈敏度高，但成本昂貴，技術(shù)要求高，且必須使用大型儀器設(shè)備。
此次福建運(yùn)用LAMP這種新穎的恒溫核酸擴(kuò)增方法，在轉(zhuǎn)基因特異品系檢測領(lǐng)域有效建立了普遍適用于檢驗檢疫一線基層實(shí)驗室的快速、簡便、高效的轉(zhuǎn)基因品系檢測方法，檢測成本遠(yuǎn)低于熒光定量PCR。
