從儀器角度解釋一下測定數(shù)據(jù)是如何計算出來的，如果大家能熟悉這一計算過程，對于出現(xiàn)負值的原因查找會有幫助。
現(xiàn)就以2點終點法為例子。
首先是吸光度度的計算，下圖給出的是一個尿酸標(biāo)本測定曲線，其中黑色圈內(nèi)的測光點是我們計算用的，分別是15點與16點的吸光度均值A(chǔ)1、33點與34點的吸光度均值A(chǔ)2。其公式為
A=A2 - K * A1其中K為液量修正系數(shù)，其計算方法為
K=(S + R1)/(S + R1 + R2)S是標(biāo)本量、R1、R2分別是試劑一、二的量這時我們得到吸光度A值后，開始濃度的計算
濃度C =[K *(A — B)+ C1]* IFA + IFB
其中B是S1ABS吸光度，也就是空白或第一標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度，
C1是空白或是第一標(biāo)準(zhǔn)液濃度，
K是K系數(shù)，也就是圖中所做標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率
IFA、IFB都是儀器常數(shù)，在一般情況下IFA=1，IFB=0，C1=0，所以該公式可以簡化成C = K *(A - B)
K系數(shù)的計算是通過儀器測定S1(標(biāo)準(zhǔn)液1)、S2(標(biāo)準(zhǔn)液2)的A值以及給定的濃度來計算的。通過以上計算我們可以知道結(jié)果為負值有兩個環(huán)節(jié)可能出現(xiàn)，一是A2—K*A1時，第二是A — B(空白吸光度)時，前一種情況說明試劑質(zhì)量完全失效，應(yīng)更換，但是日常出現(xiàn)這樣情況非常少見，而第二種情況是最多見的，所以為什么總是推薦大家每天做空白校正，就是這個原因。每天的試劑都在變化，試劑空白吸光度也在變化，這樣既可以預(yù)防試劑過期，也可以 減少被測物含量很低的標(biāo)本出現(xiàn)負值的幾率。