A：打開高壓輸液泵，首先用甲醇沖洗（包括清洗和啟動泵），在這個時間內(nèi)去配制流動相，配流動相時注意有機溶劑（色譜純）和水（二次蒸餾水）分別用油膜和水膜過濾，然后混合放在超聲波清洗器中脫氣15min。
清洗步驟：首先逆時針旋轉(zhuǎn)排空閥180度，按清洗，5min后停止，再旋轉(zhuǎn)回來。  
B：停泵換上5%甲醇水溶液（常備）沖洗（包括清洗和啟動泵），停泵再換上流動相沖洗（包括清洗和啟動泵），流量是1ml/min即可。
注意：清洗時需要旋開排空閥，啟動泵時關(guān)閉排空閥。
C：打開紫外檢測器，初始化完畢后退出，進入定波長時間掃描方式在參數(shù)設(shè)置里設(shè)置檢測波長退出，并點擊開始（查看基線）。
D：打開在線工作站，填寫實驗信息后，在數(shù)據(jù)采集中查看基線，電壓范圍為—10——100即可，基線平穩(wěn)且氘燈預(yù)熱半小時后即可進樣。
E：基線平穩(wěn)時間內(nèi)進行樣品處理，樣品最后要用針頭式過濾器過濾（注意油膜和水膜）。
F：進樣順序：首先把進樣閥旋至load位置，用平頭微量進樣器吸取多于20ul的樣品，充分插入進樣閥進樣，旋進樣閥至inject位置拔出進樣器。
G：工作站自動采集數(shù)據(jù)完畢后停止采集，保存數(shù)據(jù)到適當(dāng)位置，在方法的譜圖顯示中調(diào)適當(dāng)?shù)碾妷悍秶?，預(yù)覽打印即可。然后進另一批次的樣品。
H：實驗完畢后，首先把檢測器退出關(guān)閉，半小時后，停泵換上5%甲醇水溶液沖洗（包括清洗和啟動泵），停泵再用色譜甲醇沖洗（包括清洗和啟動泵）至高壓輸液泵壓力穩(wěn)定即可停泵關(guān)閉。
I：注意 需要檢測溫度時需打開柱溫箱設(shè)置溫度。
        流動相中不含緩沖鹽時可以省略5%甲醇水溶液的過渡。
        色譜柱長時間不用時卸下來用堵頭堵住兩頭密封保存。